文章摘要:为建立一种检测猫细小病毒抗体的间接ELISA方法,将猫细小病毒VP2蛋白共有的多个B细胞抗原进行串联表达为重组蛋白并纯化作为包被抗原。采用棋盘式方法优化反应的最佳血清稀释度和抗原包被量,同时比较了间接ELISA方法的其他反应条件。结果显示,抗原包被量为8 μg /mL,血清最佳稀释度为1:400 , 二抗的最佳工作浓度为1:10 000;TMB底物显色液37℃避光显色反应15 min。特异性试验结果显示,同猫杯状病毒和猫疱疹病毒阳性血清均无交叉反应。此方法对猫细小病毒阳性血清的敏感性为 1:5 120 ; 组内、组间变异系数均小于10%。与包被全病毒的方法平行比较,显示其检测阴阳性血清的值高度一致。结果表明,建立的基于猫细小病毒串联表达的VP2蛋白B细胞抗原表位建立的间接ELISA方法适合临床样本的检测,为猫瘟的防控工作提供了技术支撑。
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论文DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0038
论文分类号:S852.65
文章来源:《现代诊断与治疗》 网址: http://www.xdzdyzlzz.cn/qikandaodu/2021/1209/1776.html
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